除病毒过滤在单抗工艺中的应用
- 2025-09-12 09:08:58
除病毒过滤对患者安全至关重要，监管机构越来越多地要求除病毒过滤验证研究是在***差条件下进行的，ICH Q5A和PDATR41都指出低压和压力中断代表了***差的测试条件，应当在除病毒验证研究中加以考虑，Cytiva除病毒滤器SV4和Prime相关研究如下。 除病毒过滤概述
单克隆抗体是由单***B细胞克隆产生的高度均***的抗体，主要用于自身免疫疾病、肿瘤、传染病等领域的治疗，生产流程主要为：细胞培养→澄清收获→层析纯化→除病毒过滤→UFDF→制剂。
***些纯化工艺可以灭活或者去除部分病毒，由于病毒性质的多样性，***内外的指南中均指出了建议采用两种作用机制不同的工艺步骤清除病毒，至少有***步工艺对非包膜病毒有效。PDA TR41技术报告中阐述了除病毒过滤作为药品生产企业总体病毒安全策略的***部分，基于尺寸排阻的机制为病毒去除提供了有力保障。
然而，随着对除病毒过滤的知识增加（其中尺寸排阻是主要的去除机制），有报道认为：第***代除病毒过滤器的性能可能会受到过滤中断和低压力或低流速的负面影响。
新***代除病毒过滤器旨在克服这些缺点。然而，由于除病毒过滤对患者安全至关重要，监管机构越来越多地要求***终用户证明他们的除病毒过滤验证研究是在***差条件下进行的。修订后的ICH Q5A监管文件和行业指南PDA TR41进***步描述了这***点。这两份文件都指出，低压和压力中断属于***差测试条件，应当在除病毒验证研究中加以考虑。
除病毒产品及应用
Cytiva除病毒过滤产品包括PVDF（聚偏二氟乙烯）和PES（聚醚砜）两种膜材，满足不同料液过滤需求。从小试规模到生产***滤器，在生产过程中严格遵循相同的质量管理体系，不同批次间有优异的***致性、稳定性，保证生产顺利进行。
Pegasus SV4 SV4推荐的过滤压力为2.1-3.1 bar，在实际生产工艺中，可能会面临过滤中断和低压，可能会对除病毒过滤器的性能产生负面影响。 下图二测试了SV4在不同压力下，在不同体积载量下，PP7滴度降的变化情况。 10 psi 的压力产生***低的 PP7 滴度降（平均滴度降3.8 x 105） 15 psi 和 20 psi 时的平均滴度降高出 1 log 以上（分别为 7.0 x 106 和 2.2 x 106） 当压力增加到≥30 psi时， PP7滴度降≥107 应该注意的是，即使在测试的***低工作压力10 psi下， SV4仍然满足PP7滴度降>104，具有稳健的病毒清除能力。 图二：SV4不同测试压力下PP7与体积载量的滴度降情况
SV4压力中断研究如下图三，测试了磷酸盐缓冲盐水中的牛血清白蛋白在3.1 bar压力下，随着过滤体积载量的增加，中断10 minutes和30 minutes时，PP7滴度降均5 log以上，具有稳健的病毒清除能力。
图三：SV4压力中断时PP7与体积载量的滴度降情况 Pegasus? Prime
Prime推荐的过滤压力为2.1-3.1 bar，Cytiva评估了噬菌体PP7在压力范围0.2–3.1 bar下，Prime过滤器在磷酸盐缓冲盐水（PBS）中0.125–0.25 g/L IgG中的去除情况，如图五所示，即使在低至0.2 bar压力下，也有稳健的病毒清除效果。
图五：Prime在不同压力下PP7的滴度降情况
Prime压力中断研究如下图六、图七所示，测试了PBS中0.125 g/L IgG在高压力2 bar条件和低压力0.2 bar、0.3 bar条件下，随着过滤体积载量增加进行压力中断，数据显示Prime滤器的病毒清除效果未受压力中断的影响，具有稳健的病毒清除能力。
图六：Prime在高压力中断时PP7的滴度降情况 图七：Prime在低压力中断时PP7的滴度降情况 为了响应人们对在连续生物工艺中使用除病毒过滤器的日益增加的浓厚兴趣，Cytiva已经完成了研究，证明SV4和Prime除病毒滤器在低压和压力中断条件下使用的稳健性。 虽然***终用户有责任验证除病毒过滤在其特定应用条件下的性能，但本文中显示的数据有助于证明SV4和Prime强大病毒去除效果，即使在低压和压力中断的***差条件下仍具有稳健的病毒清除能力。
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