蛋白纯化系统日常维护那些事
- 2025-07-02 09:29:20
近日，“老祖宗的教诲”系列火出了圈，早先传统文化里输出的浅显易懂且实用的道理，多少年鲜有人留意和倾听。而今，借助AI技术“复活”老祖宗来重新复述和讲解，听上去确实有***番道理，有种温故而知新的感觉。
仪器维护之道，亦如先贤智慧，贵在知行合***。实验室小伙伴们是不是通常会忽略***些简单却关键的注意事项？纵使使用手册事无巨细，若使用者未给予足够重视，或交接时疏于详尽沟通，久而久之，仪器的损耗便如暗流积聚，终有***日彻底“抱恙”——实验停滞、项目受阻，更需承担高昂的维修代价，届时追悔莫及。
这里就以英赛斯公司AutoPure蛋白纯化系统为例，简要叙述仪器的日常维护和启停注意事项（其它品牌蛋白纯化系统亦可借鉴），愿诸君防患于未然，使仪器历久弥新。
01 日常维护 每天 整机流路部分 ◇ 清洁擦拭外表，防止溶液结晶盐腐蚀设备外表面以及元器件； （Ps:***些严重的仪器外观腐蚀生锈，往往从日常溅液滞留开始的。) ◇ 溶液和样品需过膜，推荐使用孔径0.45μm或相当的滤膜过滤，此操作可有效防止流路堵塞、层析柱填料及检测器脏污损坏。 ◇ 检查系统管路和接头是否存在破损，特别注意Peek管是否有压折（内径大的peek管更易弯折，如1mm白管）；防止渗漏，超压，样品损失，层析柱损坏。 ◇ 系统使用完毕后，需用纯水将系统冲洗干净至各基线平稳，随后使用20%乙醇清洗系并保存所有流路，防止流路长菌及性能下降。在使用含盐缓冲液和20%乙醇保存液中间需间隔纯水的冲洗，防止混合产生的微气泡滞留系统。 pH计 ◇ 使用前校正pH计（***定要先校正接近7的点） ◇ 使用后将pH计拆下，使用纯水冲洗并擦拭干净，浸入保护液（pH4.0饱和KCl溶液）保存 ◇ pH 电极前端由***个薄玻璃膜组成，避免磕碰、污染或干燥，否则会导致电极损坏。 系统泵 ◇ 每次使用前或更换缓冲液时，需从排空阀排出泵腔和管路里残留的气泡（使用大注射器缓慢抽出至少5ml液体），否则会影响流速的准确性，甚至导致泵无法正常出液。 每周 整机流路部分 ◇ 缓冲液入口滤网的检查和清洁，如果脏污较明显，可拆下滤网进行超声清洗。 ◇ 检查泵后润洗液，确认是否存在显著增加或减少，同时观察是否浑浊，如有异常，需更换润洗试剂（20%乙醇），并重新做好液位标记。 每月 整机部分 ◇ 使用1M NaOH溶液，AB泵各50%，以系统***大流速的10%冲洗约20分钟，随后立即用纯水将NaOH冲洗干净（电导值趋向于0）。 ◇ 使用75%乙醇溶液，AB泵各50%，以系统***大流速的10%冲洗约2分钟，随后用纯水将乙醇溶液冲洗干净。 ◇ 在线滤膜拆卸后用0.5M NaOH超声清洗10分钟。 背压阀 ◇ 通过在线/拆除对比的方式，检查背压阀压力参数（5ml/min流速下0.14MPa±0.05MPa），如有高于设置值情况，可超声清洗、调节或者更换。如有疑问，建议咨询当地售后工程师。 每半年 压力检测器 ◇ 零点检查：断开压力传感器前端及后端接头，检查显示的压力数值，如果不在零点且误差超过±0.02MPa，联系售后工程师进行上门校准。 紫外检测器 ◇使用注射器将10%的表面活性剂（如Decon90 , SDS等）注入紫外流动池，来回抽吸若干次，停留20分钟后，用纯水冲洗干净。 ◇使用注射器注入乙醇或1M NaOH注入紫外流动池，来回抽吸若干次，停留20分钟后，用纯水冲洗。 pH/电导检测器 ◇清洗流通池：拆下pH电极，安装盲堵，用1M NaOH清洗pH流通池30分钟，然后用纯水冲洗。 ◇清洗pH电极（响应慢，频发不准确时)： 1.盐沉积：0.1M HCl/ 0.1M NaOH/ 0.1M HCl交替洗数次，间隔5分钟，中间使用水清洗电极； 2.油脂沉积：1%SDS清洗后进行水洗； 3.蛋白沉积：1%蛋白酶于0.1M HCl 溶液中清洗后进行水洗。 预防性保养 ? 对整个系统做***次全面细致的维护 ? 降
